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當前位置:首頁技術文章BellBrook HTS 檢測簡介

BellBrook HTS 檢測簡介

更新時間:2021-09-07點擊次數:2058



BellBrook HTS 檢測簡介

Transcreener 和 AptaFluor HTS Assays,使用直接檢測核苷酸和均質熒光讀數的酶的通用高通量篩選分析


Transcreener® HTS Assays

使用直接檢測核苷酸和均質熒光讀數的酶的通用、高通量篩選分析。

TRANSCREENER ADP 2檢測

激酶檢測
ATP酶測定

TRANSCREENER AMP 2 /GMP 2檢測

磷酸二酯酶測定
連接酶和合成酶測定
糖基轉移酶測定
甲基轉移酶檢測

TRANSCREENER GDP 分析

GTP酶測定
差距分析
全球環(huán)境基金分析
糖基轉移酶測定

TRANSCREENER UDP 2檢測

糖基轉移酶測定

透光機 CGAMP 檢測

cGAS 檢測

TRANSCREENER ADO CD73 檢測

CD73 檢測

對數以千計的目標進行分析。

  • Transcreener 檢測依賴于核苷酸的直接免疫檢測,與復雜的酶偶聯檢測方案相比,這種檢測方法不易受到干擾。

  • 四種類型的 Transcreener 核苷酸檢測分析使您能夠更快、更有效地篩選數千種目標酶。

  • 您選擇的 FP、FI 和 TR-FRET 讀數;所有這些都具有遠紅熒光和主要多模閱讀器的認證性能。

  • 均質、混合和讀取格式可用于終點分析或酶活性的連續(xù)監(jiān)測。

  • 過夜試劑和信號穩(wěn)定性意味著大型自動化篩選中可靠、穩(wěn)健的篩選數據。

Transcreener:它是如何工作的

Transcreener 是一種通用檢測方法,可用于整個核苷酸依賴性酶家族。與其對大量特定反應產物(例如磷酸化蛋白質或脂質)使用單獨的測定法,不如對產生共同核苷酸產物的所有酶使用單核苷酸檢測測定法。例如,ADP 檢測可用作任何蛋白質、脂質或碳水化合物激酶的通用激酶測定方法。


Transcreener 檢測依賴于使用能夠根據單個磷酸基團區(qū)分核苷酸的抗體對核苷酸的直接、高度特異性檢測。產物核苷酸與底物(例如,ADP 與 ATP 用于激酶測定)的選擇性范圍從 150 倍到 1000 倍以上。這種精確的選擇性允許在存在過量底物核苷酸的情況下檢測核苷酸酶產物(例如,在存在過量 ATP 的情況下檢測 ADP 用于激酶測定),這是測量酶初始速度的必要條件。

為了產生信號,Transcreener Assays 使用同質、競爭性免疫分析形式,其中抗體與高親和力熒光示蹤劑配對。被檢測的核苷酸取代示蹤劑會導致其熒光特性發(fā)生變化。FP 檢測是簡單的;它只需要示蹤劑和未修飾的抗體;極化的變化是由示蹤劑在移動時增加的旋轉遷移率引起的。對于 TR-FRET 和 FI 格式,抗體與一種分子偶聯,該分子在結合時會改變示蹤熒光的強度,而當示蹤劑被置換時,這種效果就會消失。

Transcreener:為什么直接檢測更適合 HTS

與任何其他核苷酸檢測分析相比,Transcreener 分析具有更少的試劑和更簡單的機制,這通常需要偶聯酶將核苷酸轉化為可以與報告酶產生信號的產物。每個偶聯酶和報告酶都是被篩選化合物的潛在靶標,這會增加假陽性或錯過命中的風險,并且需要額外的孔進行反篩選。(一些 ADP 檢測分析甚至使用激酶作為偶聯酶,進一步使它們用于激酶抑制劑篩選復雜化。)

混合讀取的簡單性

直接檢測還意味著該協議是簡單、最靈活的可用方案:運行酶反應,添加具有終止混合物的 Transcreener 試劑,并讀取板。或者可以在酶反應開始時加入Transcreener檢測試劑,持續(xù)監(jiān)測酶活性;例如,用于使用“跳躍稀釋"激酶測定測量抑制劑停留時間。一些耦合方法需要額外的液體添加和孵育步驟,這使化驗自動化變得復雜并妨礙它們以連續(xù)模式運行。

使用生化分析測量藥物-靶標停留時間的指南

使用生化分析測量藥物-靶標停留時間的指南



FI & FP 檢測板

TR-FRET 檢測板




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